判斷ELISA實驗背景信號是否正常，核心是看空白孔OD值是否低于0.1。如果空白孔OD值超過0.1，說明背景信號偏高，需要排查原因。

?空白孔OD值?是判斷背景信號是否正常的直接指標。若其OD值>0.1，提示實驗存在非特異性結合或污染，需優化封閉條件或調整抗體濃度。

?優化封閉條件?是降低背景的關鍵。可嘗試延長封閉時間至1小時以上，或更換封閉劑（如使用0.8%明膠替代BSA）以減少交叉反應。

?調整抗體濃度?也至關重要。檢測抗體或酶標二抗的工作液濃度過高會顯著增加背景，需嚴格按照說明書推薦的稀釋倍數進行配制?

此外，還需確保洗滌充分（每孔注滿洗液，靜置30秒后拍干，重復3-5次），并檢查試劑是否過期或受污染。通過系統優化這些環節，可有效控制背景信號，確保實驗結果的準確性。